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熒光蛋白觀測(cè)燈面對(duì)眾多的光源波段我們?cè)撊绾芜x擇呢

更新時(shí)間:2022-07-08   點(diǎn)擊次數(shù):1355次
  熒光蛋白觀測(cè)燈是用來快速觀察篩選目標(biāo)基因表達(dá)的工具,熒光蛋白激發(fā)觀測(cè)燈能夠觀察綠色熒光蛋白、藍(lán)色熒光蛋白、黃色熒光蛋白、紅色熒光蛋白等多種熒光蛋白的表達(dá)。面對(duì)多種熒光蛋白該如何快速選擇理想的熒光蛋白激發(fā)觀測(cè)燈?
 
  R和L波段:
 
  R波段為450nm,L波段為488nm,這2給波段主要用于觀察綠色熒光蛋白。綠色熒光蛋白(Green fluorescent protein,簡(jiǎn)稱GFP)應(yīng)該在450nm、365nm、488nm里面選一種,因綠色熒光蛋白有近百種,盡管都是綠色熒光蛋白,但激發(fā)波長(zhǎng)從320nm到500nm都有,在選擇激發(fā)觀測(cè)燈時(shí),一定要搞清楚具體是哪種綠色熒光蛋白,這種熒光蛋白的激發(fā)主峰在什么波段,有了激發(fā)光譜圖,選擇靠近主峰的波段,就是理想的激發(fā)波長(zhǎng)。
 
  如果是增強(qiáng)型綠色熒光蛋白,選擇450nm或488nm是理想的。那么選擇LUYOR-3415熒光蛋白激發(fā)觀測(cè)燈的R波段,如果是野生型GFP(Wild-type GFP,wtGFP),建議選擇365nm波段
 
  C波段:
 
  C波段為505nm,主要是用于激發(fā)黃色熒光蛋白(Yellow Fluorescent Protein ,YFP)基因的表達(dá)。黃色熒光蛋白主要有Citrine, Venus, and Ypet。如果您的載體里面的標(biāo)記基因用的是Citrine, Venus, and Ypet,那么就選擇C波段。
 
  G波段:
 
  G波段為530nm波段,用來激發(fā)和觀察紅色熒光蛋白(Red fluorescent protein,簡(jiǎn)稱RFP) 的表達(dá)。紅色熒光蛋白常用的有DsRed2,mCherry、mRuby2,tdTomato。
 
  V波段:
 
  V波段:為405nm波段,是用來觀察青色熒光蛋白(Cyan Fluorescent Protein簡(jiǎn)稱CFP)的表達(dá),青色熒光蛋白激發(fā)波長(zhǎng)為405nm,發(fā)射波長(zhǎng)為485nm,如果您是用的CFP,那么選擇V波段.
 
  U波段:
 
  U波段:為365nm波段,是用來觀察藍(lán)色熒光蛋白(blue Fluorescent Protein簡(jiǎn)稱BFP)的表達(dá)和 野生型GFP(Wild-type GFP,wtGFP),推薦使用便攜式高強(qiáng)度紫外線燈。
 
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